灭菌和清洁监测常见问答
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常见问答
通用
出厂报告上的含菌量为每个单元（生物指示剂）受到热击之后的含菌量。孢子悬液的含菌量按每0.1 mL统计。每种指示剂都有专门的含菌量检测方法， 详见产品页面。
嗜热脂肪地芽孢杆菌，包含在Mesa Labs液体安瓿生物指示剂（MagnaAmp、SterilAmp II、ProSpore）中，其生长范围约为40 - 70ᵒC，因此不能在室温下生长。如果安瓿瓶保持紫色，没有变黄，则仍然可以使用。如果安瓿瓶遇到高于40ᵒC的温度，孢子就会开始发芽并失去抗热性。
用于监测蒸汽灭菌周期的典型孢子形成生物是 嗜热脂肪地芽孢杆菌。不过，这种芽孢杆菌的耐药性可能太强，无法用于低温灭菌。 可以接受采用 枯草芽孢杆菌“5230” 生产的BI，但在与产品的抗生物负载能力进行比较时， 您需要有可用的数据来证明枯草芽孢杆菌“5230” 被减弱的耐药性仍然表明您的灭菌工艺承受了足够的挑战。例如，如果您的产品生物负载能够“超过”BI中的孢子存活率，则不适合使用该特定的BI。在这种情况下，需要进行生物负载检测，以鉴定和记录产品生物负载的抗性能力，并将结果与BI抗性进行比较。要了解更多信息，请通过以下链接阅读《孢子新闻》2号卷1和《孢子新闻》3号卷1。
枯草芽孢杆菌“5230”是一种形成孢子的芽孢杆菌，其对蒸汽的抵抗性低于嗜热脂肪地芽孢杆菌 。ISO 11138-3:2017认可对该生物体的使用。Mesa使用该生物体为拥有热敏性产品的客户生产试条、液体安瓿瓶（SterilAmp II 5230）和悬浮液。
可以接受采用枯草芽孢杆菌“5230”生产的BI，但在与产品的抗生物负载能力进行比较时，您需要有可用的数据来证明枯草芽孢杆菌“5230”被减弱的抵抗性仍然表明您的灭菌工艺承受了足够的挑战。例如，如果您的产品生物负载能够“超过”BI中的孢子存活率，则不适合使用该特定的BI。在这种情况下，需要进行生物负载检测，以鉴定和记录产品生物负载的抗性能力，并将结果与BI抗性进行比较。要了解更多信息，请通过以下链接阅读《孢子新闻》2号卷1和《孢子新闻》3号卷1。
EZTest蒸汽生物指示剂非常适合诸如此类的应用。我们还提供一系列专门制造的垫片，用于牢靠地固定BI。
Mesa提供多种解决方案，用于在现场灭菌（SIP）验证期间协助您放置生物指示剂。
MeCo系列验证工具旨在通过控制生物指示剂和热电偶的放置，实现验证周期之间的一致性。 这些设备可以与芽孢试条一起使用，并提供不同的尺寸和配置以便用于管道和平面上。 请参阅《孢子新闻》2号卷14，了解关于该解决方案的更多信息。
EZTest蒸汽生物指示剂也非常适合诸如此类的应用。我们提供一系列专门制造的垫片，用于牢靠地固定BI。有关现场灭菌（SIP）验证措施的更多信息，请阅读以下《孢子新闻》。
在尝试验证或复制别人的数据时，第1条规则就是尽可能消除潜在的变化源。基本而言，您应当尽量采用原始方法来检测。含菌量的原始检测方法详见产品页面。详见产品页面。
要了解更多信息，请通过以下链接阅读《孢子新闻》6号卷4和《孢子新闻》2号卷10。
孢子的抗性能力并没有改变，而是检测条件发生了变化。为了测量D值，必须将孢子放置在载体材料上。孢子和载体共同构成了一个系统。如果改变所使用的载体材料，则系统会发生变化，所测定的抗性也会受到影响。要查看详细的讨论内容，请通过以下链接阅读《孢子新闻》1号卷5。
用于接种Mesa Labs生物指示剂的细菌孢子是非致病性、自然产生的土壤细菌，并且可能已经存在于设施中，原因是人们会通过脏污的鞋子、衣物以及对设施的日常使用而将其带入设施内。生物指示剂上的细菌孢子浓度可能高于人为引入的孢子浓度，但在采用良好实验室规范（GLP）和无菌处理的设施中不会成为问题。要了解更多信息，请阅读《孢子新闻》第4卷第5册：BI孢子是否会污染生产环境。
Mesa Labs分别在121ᵒC、124ᵒC、127ᵒC、132ᵒC、134ᵒC和135ᵒC的温度下对EZTest蒸汽灭菌生物指示剂进行D值检测。出厂报告列示了在121ᵒC、132ᵒC、134ᵒC和135ᵒC时的D值。出厂报告上列示的Z值根据ISO 11138-3"2017关于使用介于110ᵒC到138ᵒC之间的温度下的三个D值计算Z值的要求，使用在121ᵒC、124ᵒC和127ᵒC时的D值进行计算。
Mesa Labs在121ᵒC、124ᵒC、127ᵒC时对MesaStrips和芽孢条进行D值检测，然后推算出134ᵒC的算D值。出厂报告上列示了121ᵒC时的D值，以及134ᵒC时的推断D值。出厂报告上列示的Z值根据ISO 11138-3"2017关于使用介于110ᵒC到138ᵒC之间的温度下的三个D值计算Z值的要求，使用在121ᵒC、124ᵒC和127ᵒC时的D值进行计算。
要将所有液体从MagnaAmp安瓿瓶中倒（吸）出极为困难， 同样，想将所有的孢子从安瓿瓶的玻璃内壁上清洗下来也几乎不可能。最好的做法是将安瓿瓶放入250 mL的Wheaton瓶或其他耐热玻璃罐中。用无菌不锈钢棒压碎安瓿瓶。这能收集所有的培养基和芽孢并可以清洗安瓿内表面。点击下面的链接查看MagnaAmp含菌量检测指南 。
要了解更多信息，请通过以下链接阅读《孢子新闻》2号卷10： 《孢子新闻》2号卷10：存活孢子总数
A:不可以。在蒸汽灭菌循环中有三个关键变量:时间、温度和饱和蒸汽。一个液体生物指示剂只能监测灭菌腔室内的时间和温度，而无法判断是否有饱和蒸汽。
随着灭菌腔室内温度的上升，液体生物指示剂内部的温度也会上升，液体培养基将产生蒸汽。由于指示剂是密封的，指示剂内部将产生一个高压的蒸汽环境，并可能杀死孢子。生物指示剂内的孢子可能会被杀死，但如果灭菌室内没有饱和蒸汽，干燥物品上的生物负载可能只经受了短暂的干热而不会被杀死。由于液体生物指示剂不能监测饱和蒸汽，死掉的孢子（阴性的指示剂）可能只是一种虚假的安全感，因为实际上干燥物品可能不是无菌的—— 假阴性结果。饱和蒸汽的杀伤力是干热的10倍，因此时间和温度看似足够，但实际上如果没有饱和蒸汽，循环是不够的。
例如，多孔的织物或玻璃、金属仪器及机器部件等坚硬物品负载对高压灭菌器中残余空气极其敏感； 而SterilAmp, MagnaAmp和ProSpore却不敏感。少量的空气会积聚在灭菌室中最冷的位置，通常是在设备的腔内或在多孔负载的中心。与饱和蒸汽相比，在空气袋中的灭菌要慢得多。SterilAmp, MagnaAmp和ProSpore只对温度有反应。由于它们是密封的液体安瓿，它们会在内部产生饱和蒸汽来杀死孢子。 当EZTest® 或芽孢试条等纸质载体上显示有存活的孢子时，这些放置在空气袋中的密封安瓿可能被杀灭。
要了解更多信息，请通过以下链接阅读《孢子新闻》5号卷12。 《孢子新闻》5号卷12：生物指示剂选择
具体有关BI使用频率的规范和要求是由您当地的监管机构制定的。对于已经验证过的灭菌工艺，如果不使用BI来评估每个灭菌循环的效力，则只能根据关于循环物理参数放行（即参数放行）。因为根据这些参数，我们可以假设BI会被完全杀死，灭菌循环能够实现生物杀灭。但万一遇到参数不准，或是检测探头失效的情况，则无法从结果上判断假设是否成立，而留有潜在风险和隐患。Mesa Labs想要强调的是，使用BI能确保您的灭菌成功。